三聚氰胺：英文名“melamine”，简称三胺， 学名三氨三嗪， 别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。分 子 式：C3N6H6、 C3N3(NH2)3 ；分 子 量：126.12 物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味；相对密度：1570kg/m³ ；熔点：在常压下，354℃分解；升华温度：300℃；溶 解 性：能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶；微溶于水、乙醇；不溶于乙醚、苯和四氯化碳，水溶液呈弱碱性
化学性质
三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反
应生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用
途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、地板砖，厨房用具，防
火纤维，商业滤膜，胶水和阻燃剂。
固相萃取(SPE)方法
1 固相萃取(SPE)柱的选择：
三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱。混
合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/
1二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点：
1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定 pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样
品更干净，提高检测的灵敏度。
2) 批次重复性好。
3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。
2 样品前处理步骤：
2.1 标准样品配制：
取 50mg三聚氰胺标准品， 以 20%甲醇溶解定容至 50mL 得到 1000ppm的标
准溶液，使用时，以提取液(1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。
2.2 提取：
称取饲料/奶粉样品 5g (或牛奶 10ml)，加入 50ml 1%三氯乙酸提取液，充
分混匀，加入 2mL 2%乙酸铅溶液，超声 20min。然后取部分溶液转移至 10mL
离心管中，8000rpm/min 离心 10min，取上清液 3mL 过混合型阳离子交换小柱
(PCX)。
2.3 净化(PCX小柱，60mg/3mL) ：
1) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水
2) 上样：加入提取液 3mL
3) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干。
4) 洗脱： 5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。 (5%氨化甲醇的配制： 5mL氨水+95mL
甲醇)。
5) 浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇/水定容至 2mL。
2.4 检测：
用 HPLC-UV 中国农业部颁标准检测方法分析，测得 PCX 柱的回收率结果
如下：
添加水平（mg/L） 回收率
空白
0.01 116%
0.1 108%
0.5 92%
2 96%
由上表可以看出：用 PCX柱净化样品，可以得到满意的回收率。
HPLC-UV 检测方法
三聚氰胺在传统的 C18 柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有
良好的保留与分离，按照美国食品药品监督管理局（FDA）的三聚氰胺检测方法
和中国农业部颁部的三聚氰胺检测方法，采用艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列亲
水色谱柱，均能得到良好的结果，分析色谱图如下：
1、 三聚氰胺的 FDA 检测方法
色谱柱：Venusil ASB C8 4.6×250mm
缓冲液：10mM 柠檬酸，10mM 辛烷磺酸钠，调 pH为 3.0。
流动相：缓冲液：乙腈=85：15
进样量：样品用缓冲液溶解成约 0.1mg/mL，进 10uL
流 速：1.0mL/min
柱 温：40 oC
波 长：240nm
2、三聚氰胺的中国农业部颁标准检测方法
色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm
缓冲液：10mM 柠檬酸, 10mM 庚烷磺酸钠
流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10uL
流 速：1.0mL/min
柱 温：40℃
波 长：240nm
LC-MS 参考方法
由于 HPLC-UV方法中，流动相添加了离子对试剂，限制了液质联用方法的
使用；但不用离子对试剂色谱方法，三聚氰胺在传统的C18 柱上保留很差，没
有良好的保留与分离。
源于此问题，艾杰尔科技公司自主开发了新的方法，采用艾杰尔(Agela)
Venusil ASB系列亲水色谱柱，不用离子对试剂也能得到有效的保留与分离，参
考方法如下：
缓冲液：10mM NH4AC
流动相：缓冲液：ACN=95：5
流 速：1.0mL/min
进样量：先用70%ACN溶解成约1mg/mL，用ACN稀释成0.1mg/mL，进10uL
柱 温：40℃
波 长：240nm
